Ipswich PC-1186 - История

Ипсвич

(PC-1186: dp. 295, 1. 174 '; b. 23'; dr. 8 '; s. 19 k .; cpl.
65; а.13 '', 140мм., 220мм., 2ккт., 4дкп., 2дкт.)

PC-1186 был заложен компанией Gibbs Gas Engine Co., Джексонвилл, Флорида, 20 апреля 1943 года; запущен 27 сентября; спонсируется миссис Джордж Уортон и введена в эксплуатацию 9 июня 1944 года лейтенантом (младшим) Полом Л. Адамсом.

После вытаскивания и тренировки противолодочной обороны у Майами, штат Флорида, PC-1186 был назначен для сопровождения конвоев в Атлантике. С августа по декабрь она выполняла обязанности по сопровождению, патрулированию и разведке от побережья Новой Англии до Гуантанамо, Куба. В конце декабря 1944 года Шо прибыл Коко Соло, C.Z., для патрулирования и сопровождения между Панамским каналом и Кубой.

PC-1186 продолжал эти услуги до конца Второй мировой войны. После войны она патрулировала зону канала и выполняла учения с подводными лодками до 7 мая 1946 года, когда она отплыла в Чарльстон, Южная Каролина. Охотник за подводными лодками списан в Нью-Йорке 22 июля 1946 года и присоединился к Атлантическому резервному флоту. PC-1186 был назван Ipswich 15 февраля 1956 года. Ipsich ~ был исключен из Списка ВМС 1 апреля 1959 года и продан Hughes Brothers, Inc. 16 сентября 1959 года.

Ипсвичская школа & # 8211 краткая история

Из этих скромных корней ранняя история школы пошла по совершенно иному пути с приходом к власти бывшего ученика Томаса Вулси. Вулси приступил к переоснащению школы с целью обеспечения учеников для своего колледжа в Оксфорде. Томас Кромвель, доверенный советник Вулси, взял на себя эту задачу и распустил двенадцать местных монастырей, чтобы заплатить за школу.

Однако чуть больше года спустя Вулси, неспособный обеспечить столь необходимый развод Генриха VIII, впал в немилость, и монарх стремился закрыть свою новую школу. Камни, предназначенные для новых школьных зданий, были отправлены из Ипсвича в Лондон и использованы для строительства нынешнего дворца Уайтхолл. Несмотря на все трудности, Ипсвичская школа выжила. Кромвель убедил
Генри предоставил школе ее первый устав, который позже был подтвержден Елизаветой I.

К девятнадцатому веку Ипсвичская школа переехала на свое нынешнее место рядом с Крайстчерч-парком. Принц Альберт заложил первый камень в фундамент главного здания школы в 1851 году. Вскоре после этого, в 1883 году, подготовительная школа была открыта.
создан для детей в возрасте от 7 до 11 лет, являясь ступенькой в ​​старшую школу. Он переехал в свое поразительное новое здание в 2006 году.

Ипсвичская школа может претендовать на ряд выдающихся бывших учеников: Томас Уолси, кардинал, архиепископ Йоркский и лорд-канцлер Англии при Генрихе VIII, почти наверняка посещали школу. Среди видных деятелей - Томас Ховард, герцог Норфолкский, английский командующий в битве при Флоддене и контр-адмирал сэр Филип Брок. Он был капитаном HMS Shannon в знаменитом сражении с USS Chesapeake. Писатель Генри Райдер Хаггард учился здесь в 1870-х годах, и в школе учились такие выдающиеся художники, как сэр Эдвард Пойнтер, президент Королевской академии, Чарльз Кин из Punch и Эдвард Ардиццоне. В области науки ведущий нейрофизиолог и лауреат Нобелевской премии сэр Чарльз Шеррингтон на сегодняшний день является наиболее выдающимся старым ипсвичемцем.

Ипсвичистория

«Костяные детективы» - это программа Channel 4, в которой Тори Херридж и команда ученых собирают воедино истории из жизни, лежащие в основе обнаруженных костей.

В последнем эпизоде ​​команда сосредотачивается на давно забытом кладбище в Ипсвиче, где на 1400 телах обнаружены следы каторжных работ, болезней, убийств и, возможно, первое вскрытие в стране.

Производственная группа попросила меня помочь с некоторыми исследованиями, которые они проводили для программы, а затем пригласила выступить в коротком интервью в эпизоде.

Поделись этим:

Нравится:

ИСТОРИЧЕСКИЙ ПОДКАСТ IPSWICH ЭПИЗОД 6

IPSWICH И ГАНСЕАТИЧЕСКАЯ ЛИГА

В этом выпуске я говорю с Пэт Гримуэйд из Ipswich Maritime Trust о ее новой публикации о малоизвестных связях Ипсвича с Ганзейским союзом.

Ганзейский союз был конфедерацией торговых золотых изделий, которая когда-то доминировала в большей части европейской торговли позднего средневековья, соединяя порты из Германии, Нидерландов, Скандинавии, Балтики, а также некоторых портов Великобритании, включая Ипсвич. На пике своего развития Ганзейский союз даже собрал военную силу, которая выиграла войну против Дании.

Пэт рассказывает нам о том, как Ипсвич стал ганзейским портом, какие вещи продавались в Ипсвич и из Ипсвича в то время, и какие вещественные доказательства сохранились сегодня в связи с ганзейскими связями города.

Видите ли вы поразительное сходство между этими средневековыми печатями из Данцига (современный Гданьск, Польша) и Эльбинга (современный Эльблонг, Польша) и собственной городской печатью Ипсвича? Узнайте больше об этом в этом выпуске подкаста.

Вы можете слушать и подписываться на подкаст в iTunes, Spotify и т. Д. Или транслировать его онлайн: https://anchor.fm/caleb-howgego

Поделись этим:

Нравится:

ИСТОРИЧЕСКИЙ ПОДКАСТ IPSWICH ЭПИЗОД 5

РАННИЙ ДОИСТОРИЧЕСКИЙ IPSWICH

В этом эпизоде ​​рассказывается о раннем доисторическом Ипсвиче с Ханной Катлер из Археологической службы Совета графства Саффолк.

Ханна рассказывает о том, какой была область, которая однажды станет Ипсвичем, во времена палеолита (древний каменный век) и мезолита (средний каменный век). Ханна также рассказывает нам о работе, которую она в настоящее время выполняет, чтобы обновить Историческую документацию по окружающей среде для этой области, которая включает в себя улучшение информации, хранящейся в Интернете, которую представители общественности могут сами изучить, посетив https://heritage.suffolk.gov.uk /

Мы также слышим о некоторых исторических местных раскопках ранних доисторических находок, в том числе Ниной Лейард, одной из первых женщин-археологов и антикваров.

Вы можете слушать в iTunes, Spotify и т. Д. Или в потоковом режиме онлайн: https://anchor.fm/caleb-howgego

Нина Лейард с киркой в ​​руке, руководившая раскопками на Фоксхолл-роуд в Ипсвиче, 1903-1905 гг.

Поделись этим:

Нравится:

ИСТОРИЧЕСКИЙ ПОДКАСТ IPSWICH ЭПИЗОД 4

Мост Оруэлл через реку Оруэлл

Вы можете прослушать выпуск, выполнив поиск подкаста в iTunes, Spotify и т. Д. Или транслируя его в Интернете: https://anchor.fm/caleb-howgego

В этом эпизоде ​​я говорю с Энди Паркером о том, как река Оруэлл была подарена Ипсвичу королем Генрихом VIII в 1519 году и почему Ипсвич оказался единственным городом в стране, у которого есть река.

Энди является волонтером Ipswich Maritime Trust, который стремится защищать и популяризировать удивительную морскую историю и наследие рек Оруэлл и Ипсвич. Энди написал для Ipswich Star статью, в которой объясняет, как Ипсуичу подарили реку Оруэлл, которую вы можете прочитать, перейдя по этой ссылке:

Я также говорю со своим отцом, Дэвидом Хоуджего, о том, как он стал Фрименом Ипсвича и какие дополнительные права (если таковые имеются) Фримен на самом деле имеет сегодня.

Поделись этим:

Нравится:

ИСТОРИЧЕСКИЙ ПОДКАСТ IPSWICH ЭПИЗОД 3

Этот мини-выпуск подкастов посвящен истории Каштанового пруда, расположенного на восточной окраине Ипсвича в Рашмир-Сент-Эндрю, и его прошлым связям с контрабандой.

В нем также рассказывается еще одна местная история о том, как место под названием Кошачий дом когда-то участвовало в контрабанде на реке Оруэлл.

Вы можете найти выпуск в iTunes, Spotify и т. Д. Или транслировать его онлайн: https://anchor.fm/caleb-howgego

Поделись этим:

Нравится:

BBC RADIO SUFFOLK ИНТЕРВЬЮ

Недавно меня очень любезно пригласили в программу Lesley Dolphin & # 8217s BBC Radio Suffolk в качестве гостя на диване, чтобы рассказать о местной истории и о том, как я заинтересовался ею. Это аудиозапись моего интервью из программы, вышедшей в эфир 16 марта 2020 года.

Поделись этим:

Нравится:

ГОРОДСКИЕ СТЕНЫ

Ипсвич не всегда был относительно мирным городом, который мы находим сегодня. Когда-то он подвергался набегам, иногда даже со стороны континентальных мародеров. Один из способов, которым жители средневекового Ипсвича пытались повысить безопасность своего города, заключался в строительстве оборонительного периметра. Сегодня похоже, что в Ипсвиче нет никаких следов древней городской стены, так что же это были за городские оборонительные сооружения и когда они исчезли?

Сохранилась запись, в которой упоминаются городские рвы, вырытые в 1203 году, но, возможно, это относится к продолжению еще более старой оборонительной линии. Хотя некоторые ссылки на городские стены делаются в документах на протяжении следующих нескольких столетий, чаще оборонительные сооружения упоминаются как «великие рвы города». Приказ 1604 года о укладке гравийной дорожки на вершине стен ясно дает понять, что большая часть, если не все, валы в этом месте были земляным валом, а не каменной стеной. Поэтому кажется вероятным, что оборонительные сооружения состояли из ряда рвов и земляных валов со стенами, соединяющими их в наиболее слабых местах. Эта линия обороны должна была огибать западный, северный и восточный края Ипсвича - южный край города спускался к реке Оруэлл. По мере роста города сообщества развивались за пределами крепостных валов, но те, кто жил внутри, пользовались большей безопасностью, хотя платили больше налогов за эту привилегию.

Хотя степень использования каменных стен, по-видимому, была минимальной, определенно были каменные ворота, расположенные через определенные промежутки вокруг городских валов. Исторически Ипсвич был скорее центром торговли, чем военным оплотом, и ворота использовались как для регулирования торговли, так и для обеспечения безопасности. Тележки с товарами прибывали к этим воротам, а затем либо пропускали, либо запрещали въезд в город. Одним из самых впечатляющих из них были Западные ворота, внушительное сооружение с зубцами, которое в 1448 году было преобразовано в тюрьму на многие годы.

Тщательный осмотр карты Джона Спида 1610 года показывает городские стены (особенно ясно к северу от города. В ключе также указаны различные городские ворота.

Вестгейт был снесен в 1780-х, а к началу 1900-х практически все валы, рвы и ворота исчезли. Последнее очевидное место, где можно было увидеть какую-либо из бывших оборонительных сооружений, было к северу от города, где на вершине земляного вала стояли несколько викторианских домов. Затем эту территорию выровняли и превратили в место для автостоянки, а позже она стала автобусной станцией у Башенного вала.

Фотография торгового центра Tower Ramparts, сделанная в 2014 году до того, как он был реконструирован и переименован в Sailmakers.

В то время как физические останки исчезли, память об валах и воротах живет сегодня в местах и ​​названиях улиц в Ипсвиче, таких как Tower Ramparts и Northgate Street. Ближайший к нам вид на городские оборонительные сооружения - это посетить таверну «Алебарда», так как говорят, что последние следы Северных ворот были встроены в подвал этого здания.

Поделись этим:

Нравится:

ПОДКАСТ ИСТОРИИ IPSWICH ЭПИЗОД 2

Серия 2 & # 8211 Ипсвич, 17 век и Восточно-английская охота на ведьм

В 1645 году началась крупнейшая в истории Англии охота на ведьм, и Восточная Англия оказалась в ее мрачном центре. Сотни людей были повешены в Восточной Англии в течение следующих нескольких лет после того, как предстали перед судом по обвинению в колдовстве. Однако одна женщина по имени Мэри Лэкленд, которая жила в Ипсвиче, была приговорена к особо суровому приговору - сожжению за предполагаемые преступления.

В этом выпуске подкаста я рассказываю Дэвиду Джонсу о его книге. Ипсвичская ведьма, Мэри Лэкленд и Саффолкская охота на ведьм.

Мы говорим о том, какой была бы жизнь людей, живущих в Ипсвиче 17 века, об идеях Дэвида о том, что могло привести к суду и казни Мэри Лэкленд, о методах, используемых искателями ведьм для проверки невиновности или вины преступников. обвиняемых, и что могло быть причиной появления судебных процессов над ведьмами на таком экстремальном уровне в 1640-х годах.

Подкаст доступен в iTunes, Spotify и большинстве других поставщиков подкастов. Если у вас нет доступа к устройству с приложением для подкастов, вы также можете прослушать его, перейдя по этой ссылке прослушать подкаст Ipswich History

Поделись этим:

Нравится:

IPSWICH В 50 ЗДАНИЯХ

Я рад сообщить, что новая книга, над которой я работал, называется Ипсвич в 50 зданиях будет опубликован 15 июня 2019 г.

Я буду отмечать выпуск книги раздачей книг в музее Ипсвича в субботу, 6 июля, в 14:00, где книгу также можно будет купить в магазине музея. Приглашаем всех присутствовать и # 8211 было бы здорово увидеть вас там!

Вот аннотация, если вы хотите узнать больше о Ипсвич в 50 зданиях:

У Ипсвича есть увлекательная история, восходящая к его англосаксонским корням, когда он был поселением на берегу реки Оруэлл в Восточной Англии. С тех пор город был одним из важнейших портов Англии, центром средневековой торговли шерстью, а в викторианскую эпоху превратился в процветающий промышленный центр. Самобытная история Ипсвича воплощена в зданиях, которые формировали город на протяжении веков, поскольку сменяющие друг друга поколения оставляли свои архитектурные следы.

Ипсвич в 50 зданиях исследует богатую историю города через выбор его архитектурных жемчужин, от великолепных средневековых церквей и сокровищ эпохи Тюдоров, таких как особняк Крайстчерч, до современных шедевров, таких как новаторский дизайн здания Уиллис. Писатель и историк Калеб Хаугего воспевает архитектурное наследие Ипсвича новым и доступным способом, проводя читателя по историческим и современным зданиям города.

Поделись этим:

Нравится:

БАЗИЛИЙ БРАУН СОБЫТИЕ

Как вы знаете, если вы давно читаете этот блог, я большой поклонник археолога Саффолка Бэзила Брауна. В начале этого года я сделал о нем подкаст, который вы можете послушать здесь.

Я собираюсь вести мероприятие «Секреты музея» в музее Ипсвича, посвященное Бэзилу Брауну (который когда-то сам был служителем музея в Ипсвичском музее) в воскресенье, 25 ноября 2018 года, с 14.15 до 15.15. Это бесплатное мероприятие без предварительной записи, поэтому нет необходимости бронировать его для посещения.

Более подробную информацию о мероприятии можно найти по этой ссылке: Секреты музея - Бэзил Браун: археолог Саффолка.

Шестая форма

История уровня представляет собой интересный и увлекательный курс, который улучшит ваши навыки анализа и умение писать убедительные и ясные аргументы. Это квалификация, которую высоко оценивают конкурентоспособные университеты, независимо от того, подаете ли вы заявку на получение степени в области искусств, социальных наук или естественных наук.

Вы будете воодушевлены учителями, которые работают в своих специализированных областях. Курсы проводятся с использованием материалов, написанных кафедрой и сопровождаемых широким спектром соответствующих книг.

Вы будете ориентированы на дальнейшее чтение по мере развития ваших собственных интересов. Вам будет предложено спорить и дискутировать как со сверстниками, так и с учителями. Со временем от вас также ожидается, что вы начнете работать независимо и станете самодостаточным учеником. Самое главное, вы охватите некоторые из самых увлекательных и противоречивых аспектов современной истории.

В 12 классе мы изучаем историю Германии и Западной Германии с 1918 по 1989 год, включая расследование исторических дебатов о причинах Второй мировой войны. К нему прилагается статья, в которой рассматриваются подъем и падение фашизма в Италии в период с 1911 по 1946 годы. В 13-м классе мы переходим к рассмотрению отношений между Ирландией и Союзом c1774-1923 гг. Существует также модуль курсовой работы, в котором студенты будут производить независимую работу по исторической дискуссии, связанной с Холокостом.

Экзаменационная комиссия - Edexcel. В преддверии экзаменов предоставляется обширная программа пересмотра.

«Мне только что была присуждена степень первого класса по международной истории в Университете Лидса… и я искренне верю, что это было бы невозможно без вашей постоянной поддержки и поощрения». Бывший студент-историк уровня A Level.

Следите за историческим факультетом Ипсвичской школы в твиттере @IpswichHistory.

Результаты экзамена

Среднее значение результатов в истории за последние три года составляет:

История

Первоначально в специально построенном поздневикторианском здании были объединены функции музея, библиотеки и картинной галереи. Библиотека была удалена в начале 20-го века, но Художественная галерея и музей продолжали делить помещения до 1970-х годов.

Музеи как вдохновение

Когда музей и картинная галерея были связаны, музейные коллекции стали прямым источником вдохновения для работы как студентов, так и сотрудников. Некоторые из ранних работ Мэгги Хэмблинг и скульптуры птиц Бернарда Рейнольдса обеспечивают очевидную связь.

Многие другие художники вдохновлялись и продолжают вдохновляться музейными коллекциями, особенно идеей `` Кабинетов редкостей '', которая легла в основу современных музеев и духом которой до сих пор присутствуют некоторые современные музеи, такие как Питт-Риверс или Викторианская галерея. в Ипсвичском музее. Ранние работы Дэмиена Херста черпали непосредственное вдохновение в этой теме.

Ряд выдающихся художников, таких как Марк Дион, продолжают использовать идеи и системы научной и музейной каталогизации и классификации в качестве источника для своих работ.

Союз музея, особенно идеи «Кабинета диковинок», и современного искусства имеет давние и уважаемые традиции и то, что может быть воплощено в новом объединенном месте.

Искусство ХХ века

Группа Бентон Энд (иногда называемая Восточно-английской школой живописи и рисунка) была открыта Седриком Моррисом (1889-1982) и Артуром Леттом Хейнсом (ум. 1978) сначала в Дедхэме в 1937 году, а с 1940 до конца 1970-х годов в Бентоне. Конец, недалеко от Хэдли Суффолк. Это оказало большое влияние на многих художников Саффолка и внесло жизненно важный вклад в обучение искусству на востоке Англии в течение сорока лет.

Бентон-Энд руководствовался весьма своеобразными линиями. Не было формального обучения, больше создания среды, в которой художники могли бы раскрыть свой потенциал. Атмосфера вдохновляла многих художников и стала определяющим фактором в ранней карьере Люсьена Фрейда и Мэгги Хэмблинг, среди прочих. В коллекции Ипсвича уже есть несколько картин художников, связанных с Бентон Энд, в том числе Седрика Морриса, Артура Летт-Хейнса, Мэгги Хэмблинг, Люси Харвуд, Джоан Уорбертон и Глина Моргана. Среди других заметных фигур, на которых оказал влияние Седрик Моррис и группа, также была Бет Чатто.

Художественная школа Ипсвича также привлекла в свой штат многих талантливых художников, скульпторов и граверов, в том числе Бернарда Рейнольдса, Леонарда Белка, Лоуренса Селфа и Колина Мосса, которые представлены в коллекции. Некоторые известные ученики включают Мэгги Хэмблинг и Брайан Ино.

Близость двух школ означала, что многие художники имели связи с обеими или пересекались между ними, включая, в частности, Мэгги Хэмблинг и Бернарда Рейнольдса. В настоящее время также есть некоторые возможности значительно увеличить количество работ некоторых из этих художников, в том числе Седрика Морриса, как в качестве примеров их искусства, так и в качестве иллюстраций того, как они работали.

Ипсвич, Саффолк

После своей смерти в 1551 году богатый купец Генри Тули оставил крупную сумму, которую нужно было использовать для оказания помощи и жилья бедным Ипсвича. В 1569 году фонд, основанный на его имя, приобрел бывший доминиканский монастырь на нынешней улице Фундамент-стрит, чтобы основать первый в городе работный дом, который стал известен как Госпиталь Христа. Он мог вместить 40 заключенных, включая как «невинных» бедняков (престарелых, сирот, вдов и больных), так и «ленивых» бедняков (бродяг, бомжей и попрошаек). В 1574 году на этом месте произошла серьезная реконструкция, и были включены мастерские, чтобы обеспечить 40 человек такими работами, как чесание, прядение и ткачество. После принятия Закона 1601 года о помощи бедным, который возложил ответственность за разгрузку на отдельные приходы, больница Христа, похоже, перестала быть муниципальным работным домом и вместо этого взяла на себя роль благотворительной школы для обучения бедных детей.

В парламентском отчете 1777 года перечислено дюжина приходских работных домов в Ипсвиче: Святой Климент (с размещением до 70 заключенных), Святой Елены (10), Святого Лаврентия (25), Святой Маргариты (100), Святой Марии в Вязах ( 10), Святой Марии у Ключа (25), Святой Марии Сток (30), Башня Святой Марии (30), Святого Матфея (30), Святого Николая (20), Святого Петра (28) и Святого Стефана (24) .

После 1834 г.

Союз закона о бедных в Ипсвиче был образован 9 сентября 1835 года. Его деятельность контролировалась избранным Советом попечителей в количестве 20 человек, представляющих 14 входящих в его состав округов, как указано ниже (цифры в скобках указывают количество опекунов, если их более одного):

Графство Саффолк: Св. Климента (3), Св. Елены, Св. Лаврентия, Св. Маргариты (3), Св. Марии-на-Вязах, Св. Марии на набережной, Св. Мэри-Сток, Св. Марии-на-тауне, Св. Мэтью ( 2), Святой Николай, Святой Петр (2), Святой Стефан, Вестерфилд, Уиттон.

Население Союза при переписи 1831 года составляло 20 528 человек, начиная от Уиттона (346 человек) и кончая Святым Климентом (4 779 человек). Среднегодовые расходы по бедным ставкам за период 1833–1835 годов составляли 13 685 фунтов стерлингов или 13 шиллингов 4 пенни. на душу населения.

Мастерская на Грейт-Вип-стрит

Новый Ipswich Union приобрел участок площадью 3,5 акра на Грейт-Уип-стрит у госпиталя Христа за 525 фунтов стерлингов для строительства работного дома. Известный как работный дом Святого Петра, он был построен в 1836-1877 гг. И обошелся в 6 585 фунтов стерлингов и предназначался для размещения до 400 заключенных. Архитектором был Уильям Мейсон, который также отвечал за схемы расширения рабочих домов в Хартисмере и Бери-Сент-Эдмундс.

Здание Грейт-Кнут-стрит было построено из красного кирпича. Его планировка в целом следовала популярной крестообразной или «квадратной» конструкции. Его входной блок на Грейт-Кнут-стрит содержал зал заседаний и приемные палаты. Сзади от центральной восьмиугольной ступицы расходились четыре крыла. Внешний периметр образовали одноэтажные мастерские и хозяйственные постройки. Позже в задней части здания была пристроена часовня, а также лазарет. Расположение и план работного дома показаны на карте 1884 года ниже.

Строительный дом на Грейт-Кнут-стрит в Ипсвиче, 1884 год.

Хит-роуд работный дом и лазарет

В 1898–1898 годах на участке зеленого поля на южной стороне Вудбридж-роуд были возведены новый рабочий дом в плане павильона и лазарет. Его дизайн был открыт для конкурса, и победившие планы были представлены Стивеном Солтером и Х. Перси Адамсом с Листером Ньюкомбом. Строительные работы начались в 1896 году, когда строители Джордж Гримвуд и Сон договорились о цене 25 773 фунтов стерлингов за работы. Окончательная стоимость работного дома, в котором могли разместиться 369 заключенных, составила более 30 000 фунтов стерлингов. На чертеже архитекторов изображен объект с высоты птичьего полета.

Новый работный дом и лазарет в Ипсвиче с севера, 1899 год.

В приемном блоке на северо-западе стоянки находились домик привратника, приемные палаты и камеры для бродяг. На первом этаже располагалась кладовая для одежды бедняков.

Вход в Ипсвичский домик с северо-востока, 2001 г.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Приемный блок Ипсвича с северо-востока, 2001 г.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Главное здание работного дома представляло собой центральный административный блок, соединенный коридорами с двухэтажными флигелями: мужские на западе, женские на востоке. На первом этаже каждого крыла были комнаты отдыха, ванные, туалеты, общежития и спальные комнаты для больных. На первом этаже были общежития. В передней части центрального блока находились зал заседаний и хозяйские помещения. В задней части центрального блока находилась столовая на 270 мест, которая также служила часовней.

Медпункт работного дома находился на юге участка.

Больница Ипсвича с юго-востока, 2001 год.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Расположение и план участка показаны на карте 1903 года ниже.

В 1930 году лазарет работного дома превратился в Общий лазарет района Ипсвич, а часть работного дома продолжила свое существование как Учреждение общественной помощи Хитфилдс. В 1955 году это место стало крылом Хит-Роуд больницы общего профиля Ипсвича. Главное здание работного дома было снесено, но несколько других блоков сохранились.

Бывший вход в Ипсвич с запада, 1950-е годы.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Питер Коллиер, родители которого руководили Хитфилдс с 1937 по 1946 год, вспоминает:

Мы с родителями переехали сюда где-то в 1937 году и оставались там до 1946 года, когда мы переехали в Солфорд. Мой отец был назначен начальником старого работного дома, а во время войны был назначен управляющим госпиталя и отвечал за мирские административные вопросы. В больнице была отдельная медсестра.

В центральном блоке работного дома находилась большая прачечная, которая обслуживала как работный дом, так и лазарет. Была также большая кухня, но я не могу вспомнить, обслуживала ли она обе части или только работный дом. У учреждения также были обширные земли к югу от больницы, которые включали ферму, как пахотную, так и животноводческую (наверняка крупный рогатый скот и свиней, и, возможно, там были рабочие лошади). Были и фруктовые сады. Работный дом имел «рабочую площадку» под контролем мастера по труду, который курировал ручную работу трудоспособных заключенных, например. распиловка бревен.

На фотографии ниже изображен фасад работного дома, сделанный моим отцом примерно в 1937 году. Наше жилье состояло из левого первого этажа и всего второго этажа.

Вход в Хитфилдс с юго-востока, 1937 год.
и скопируйте Питера Кольера.

Жизнь в работном доме не была полностью лишена светских мероприятий, по крайней мере, в том, что касается персонала и Стражей, если судить по приведенной ниже фотографии «Бала работного дома» 1912 года. Однако тексты, украшающие стены, кажутся несколько противоречащими судебным разбирательствам.

Бал в Ипсвичском рабочем доме, 1912 год.
и скопируйте Питера Кольера.

Детский дом Святого Иоанна

Отдельный дом для бедных детей был впервые предложен Ipswich Union примерно в 1870 году. Это был необычный шаг для неметропольных профсоюзов в то время и, возможно, был результатом нехватки места в рабочем доме на Грейт-Уип-стрит. Планы были разработаны в 1871 и 1873 годах для длинного здания с центральным блоком, окруженным отдельными крыльями, в которых размещались помещения для мальчиков и девочек. Здание, построенное на Блумфилд-стрит в 1879 году, вмещало 80 мальчиков и 50 девочек. Мальчиков учили работать на земле, а также к портному делу, изготовлению обуви и плотницким работам. Девочек обучали рукоделию и другим домашним навыкам, чтобы подготовить их к работе по дому. Позже был добавлен небольшой лазарет.

Ипсвичский детский дом Святого Иоанна, 1927 год.

Детский дом Святого Иоанна в Ипсвиче, около 1910 года.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Детский дом Святого Иоанна в Ипсвиче, около 1910 года.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Столярная мастерская Ипсвичского детского дома Святого Иоанна, около 1910 года.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Детский дом Святого Иоанна в Ипсвиче, начало 1900-х годов.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Детский дом Святого Иоанна в Ипсвиче, начало 1900-х годов.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Детский дом Святого Иоанна в Ипсвиче, начало 1900-х годов.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Детский дом Святого Иоанна в Ипсвиче, начало 1900-х годов.
и скопируйте Питера Хиггинботэма.

Имущество, позднее известное как Freelands, было снесено в 1970-х годах. Сейчас на участке расположен жилой комплекс.

Сотрудники

Сокамерники

Записи

Примечание: многие репозитории устанавливают период закрытия до 100 лет для записей, идентифицирующих личность. Перед поездкой на большие расстояния всегда проверяйте, доступны ли записи, к которым вы хотите обратиться.

• Офис записи Саффолка, Гатакр-роуд, Ипсвич IP1 2LQ. В его фондах: протоколы хранителей (1835-1930 гг.) Рождений (1836-1938 гг.) Смертей (1836-1933 гг.) Регистры вероисповедания (1906-50 гг.) Регистры вероисповеданий Детского дома Святого Иоанна и книги записей (1882-1950 гг.) И т. Д.

Ссылки

Подтверждение

Если не указано иное, эта страница () является собственностью Питера Хиггинботама. Воспроизведение содержимого без разрешения запрещено.

История

Согласно записям, датируемым 1689 годом, на территории нынешнего отеля Ipswich Inn располагалось несколько домов. Первоначально это был кирпичный дом, принадлежавший мистеру Томасу Брейси, который продал его Роберту Пейну, «старейшине церкви Ипсвича». Как сообщается в записях, он был человеком, прежде всего ревностным к образовательному прогрессу общины. В 1689 г. 12 февраля 1689 г. мистер Пейн передал во владение свой особняк и три акра земли с фруктовым садом, садом и т. Д. Своему сыну Роберту Пейну-младшему (IPS. Deeds 5: 590).

Год спустя собственность, которая состояла из двух и трех четвертей акров, была продана мистеру Фрэнсису Уэйнрайту 30 сентября 1690 г. (Ips. Deeds 5: 326). иммигрант, с отличием служил в войне Pequot в молодости. Он стал зажиточным купцом и видным гражданином. Он умер 19 мая 1692 года.

Его сын, которого также звали Фрэнсис, окончил Гарвардский колледж в 1686 году. Он был полковником полка, городским секретарем, представителем в общем суде, Феффи и судьей суда общих сессий. Он умер 3 августа 1711 года.

На сорок восьмом году своего возраста В 1740 году поместье снова было продано капитану Томасу Стэнифорду. Капитан Станифорд, согласно записям, был & ldquogentlemen & rdquo, который занимал дом до своей смерти 28 февраля 1740 года. Его завещание было подано 7 сентября 1778 года (Pro. Rec. 353: 206), и описи его состояния, поданная 9 декабря 1778 г. (353: 316) раскрывает обстановку одного из прекрасных особняков революционного периода по завышенным ценам, которые преобладали в то время. Представляют интерес некоторые предметы, которые определяют гардероб джентльмена того времени и различные предметы мебели.

Сын капитана Томаса Стэнифорда также был капитаном, и его звали Джеймс. Капитан Джеймс Стэнифорд занимал особняк, который часто называют «старым кирпичом», потому что у него были кирпичные концы, и в нем находилась гостиница. Он также приобрел у Ричарда Даммера Джветта половину из пяти и трех четвертей акров прилегающей земли 28 мая 1803 г. (172: 178).

Наследники Джеймса Стэнифорда и его сына Джеймса продали «кирпичный дом» и восемь с половиной акров д-ру Томасу Мэннингу 10 июня 1830 г. (259: 76). Доктор Мэннинг продал «старый кирпич» своему сыну, доктору Джозефу Мэннингу из Чарльстона, Южная Каролина, 27 декабря 1830 г. (266: 73) и передал его Джону Джуэтту 9 декабря 1835 г. (290: 121 ). Мистер Джуэтт снесли старый особняк, который все еще находился в отличной сохранности, и построил на его месте кирпичное жилище, которое было куплено несколько лет назад и снесено мистером Джоном Б. Брауном и мистером Гарри Б. Брауном.

Имущество прошло через еще несколько семей и, в конечном итоге, 27 марта 1814 года перешло во владение Сюзанны Уилкомб, которая продала свой участок попечителям методистской епископальной церкви. Затем на этом участке был построен молитвенный дом, который использовался церковью до постройки нынешней церкви. Затем участок был продан попечителями методистской епископальной церкви Роберту Джордану 17 мая 1862 года. Роберт Джордан был ветераном гражданской войны, который после войны зарабатывал себе на жизнь обычным торговцем. Мистер Джордан построил этот дом в апреле 1863 года. Годы спустя дом принадлежал доктору Бейли, местному врачу, который лечил своих пациентов в своем кабинете в задней части дома.

Дом Роберта Джордана - прекрасный образец викторианского итальянского стиля, расположенный на акре земли в центре исторического города Ипсвич. В задней части дома есть террасы, на которых выращивали тутовые кусты для производства шелкопряда и шелкопряда, которые процветали в Ипсвиче в начале 1800-х годов. Interesting architectural features of the house include the Belvedere on the third-floor roof, the curved front stairway, original ceiling moldings, and the ice house at the rear of the main house, which was part of the &ldquosummer kitchen&rdquo. The carriage house is at the back of the property.

Margaret and I bought this house in 1996. We had been on Pleasant Street for twenty-two years, and after our three kids grew up got married, Margaret decided we needed more room. A bed and breakfast was not in our plans but we began to think of the fun it would be meeting new people, and sharing our home with strangers that wanted to pay us for being here (a no-brainer). So, out of those thoughts and dreams, came our B&B, which grew to become The Ipswich Inn.

This is our 20th year. All we wanted and wished for has come true. This has been a great adventure that continues to bring more and more people into our lives that have become friends. We truly hope your stay with us and your meal will be as pleasant and restful as the joy we have in bringing it to you.

The Regent Theatre Ipswich opened in 1929 as a cine-variety hall. At 7.00pm on Monday November 4th, the entrance doors of the new Regent, Ipswich opened and into its spacious foyer crowded nearly 2,000 Ipswich people who had come to witness this momentous occasion.

Ipswich Regent Theatre Opening Night 1929

Opening night screening of The Last of Mrs. Cheyney

1963 Show Poster for The Beatles Headlining at the Ipswich Regent Theatre then known as The Gaumont

The Beatles Headlining at the Ipswich Regent Theatre in 1963 then known as The Gaumont

Outside the theatre a large queue had formed, filing past Botwoods Garage. As a Ransomes steam lorry tooted its whistle, the staff of the Regent lined up for their first inspection by the manager, Albert E. Crabb who checked their ‘electric’ torches.

On the stage, the Mayor of Ipswich, Dr Hossack, performed the opening ceremony musical numbers were played on the brand new Wurlitzer organ by the resident organist Frank Newman F.R.C.O. that included the Merry Wives of Windsor by Otto Nicolai. The film chosen to open the venue then began – “The Last of Mrs Cheyney” starring Norma Shearer and Basil Rathbone – an ‘all-talking’ picture with front circle seats costing 2s / 4d.

The luxurious Regent restaurant enhanced a visit to the theatre and, if desired, tea could be served in any of the fourteen boxes at the rear of the stalls. The boxes and the Manager’s cottage at the rear of the theatre are unique features of the Regent.

Before World War II, the stage was not used to any great extent, although up to the mid-1930’s, the 18 piece Regent Orchestra, under the direction of Louis Baxter frequently entertained the audiences. Most theatre orchestras were disbanded in the late 1930’s and the organ then became the principal musical attraction.

During the war the Regent provided much needed escapism and helped sustain public morale. After the war, The Regent flourished and enjoyed an attendance boom. Also during this period, the stage was employed in the presentation of Ipswich Civic Concerts. The stage was also used for the presentation of Sadler’s Wells Ballet, Carl Rosa Opera and one-night band shows.

The popularity of cinema in the 1930’s and 40’s was so great that another cinema in Ipswich, The Ritz, was opened in 1937. But the advent of television in the 1950’s proved a testing time for cinemas up and down the country and even the highly successful Regent, by now known as the Gaumont, did not survive intact. To allow the cinema to become more profitable, the restaurant was closed down and replaced by the Victor Sylvester Dance Studio.

In the late 1950’s the ‘pop’ music phenomenon exploded. Buddy Holly and the Crickets started off the craze at the Gaumont and since then thousands of international artists have graced the theatre’s stage including the Beatles, Tina Turner, The Bay City Rollers, Tom Jones, Chris Rea, Status Quo and many of today’s top artistes.

From 1958, local musicians and dramatic societies were encouraged to perform at East Anglia’s largest theatre. These included the Ipswich Operatic Society, the Gilbert and Sullivan Society and later the Co-op Juniors. The programme has since included a wide range of productions including professional touring theatre, opera, ballet, comedy and full-scale orchestras.

By 1965 the proprietors, The Rank Organisation, were sufficiently confident of the future to spend £50,000 on a major modernisation and redecoration programme. But by the 1970’s, the large cinemas that had been so successful in the 30’s and 40’s proved to be less economically viable.

The Gaumont’s dance studio was converted to a luxury 200-seat cinema, which could be rented out for use by the local business community. Rank also proposed to convert the main auditorium to a multi-screen complex. However, after a great deal of persuasion, Rank’s plans were abandoned because the auditorium was established as the only local venue of sufficient capacity to stage live shows and concerts despite its limited performance facilities.

The theatre was re-launched in September 1991 after Ipswich Borough Council successfully negotiated the ownership from the Rank Organisation and NCP. Today, Ipswich Borough Council continues to fund the theatre as part of its arts and entertainment portfolio which also includes the Corn Exchange and Ipswich Film Theatre.

Based on an article written by David Lowe, Manager 1958-1989.

Materials and methods

Nanopore sequencing and datasets

Nanopore sequencing data for NA19240 [26], NA12878 [24], and Ashkenazi trio [29] human cell lines are publicly available. A complete description of the datasets, their base calling, mapping, and usage in our study are provided in additional file 1 along with the link to the sources.

We also sequenced the Colo829BL B-lymphoblast cell line using one nanopore PromethION flow cell and Illumina paired-end sequencing at 30× coverage. A complete description of nanopore and Illumina sequencing protocols and data obtained is also provided in Additional file 1.

CpG methylation calling from nanopore data

To call CpG methylation, we benchmarked three model-based approaches: Nanopolish [10], Megalodon [14], and DeepSignal [15]. Nanopolish uses a hidden Markov model to call CpG methylations from raw nanopore data while Megalodon and DeepSignal use neural networks. We called CpG methylation using these tools (with the default parameters) for 12 flow cells of NA12878 publicly available data (Additional file 1) and compared the results with WGBS data from ENCODE project (ENCFF835NTC) [51] and Human Methylation 27 (27k) array from Fraser et al. [25].

Variant calling

We used Clair to call SNVs [22]. We called variants for each chromosome using clair.py callVarBam --threshold 0.2 и HG122HD34 model. Indels were filtered out. To evaluate variant calling, we compared SNVs called by Clair from nanopore data to those from 1KGP phase 3 [30] (GRCh37 coordinates). Clair’s variant calls were lifted over to GRCh37 human reference genome coordinates using CrossMap [52] for comparison to 1KGP data.

For our in-house Colo829BL sample, we compared Clair variant calls to Strelka [53] v 2.9.10 calls made from paired-end Illumina reads (Additional file 1).

Model training to improve SNV calling

We calculated average qualities and mutation frequencies for each position of each 5-mer window containing an SNV. Mutation frequencies were calculated as the number of instances over coverage for each genomic position in the 5-mer window. Base qualities for a given position were calculated as the average of all base qualities mapped to the position. We used these as inputs to a fully connected artificial neural network classifier composed of four hidden layers with a relu activation function. The first hidden layer is six times larger than the input layer and the size of subsequent hidden layers decreases through a factor two.

We trained three models to compare the classifier using different coverages. NA12878 20 flow cells (24×), NA12878 all flow cells (44×), and HG003 (80×) were used for training. First, we called variants for each dataset using Clair and then determined true and false positives using high-quality variants using the Genome in a Bottle database (GIAB) [27]. Using NA12878 20 flow cell data, a randomly selected balanced dataset of 25 million 5-mers was used for training and 4 million unseen randomly selected 5-mers were used as the validation set. For the NA12878 whole dataset and HG003 sample, the training datasets were 18M and 14.9M, respectively, and validation sets were 2.5M and 2M, respectively (Additional file 2: Fig. S6). The NA12878 20 flow cell model was used for < 30× coverage data, NA12878 all flow cells for 30×–45× coverage data, and HG003 model for > 45 coverage data.

Phasing single nucleotide variants detected from nanopore sequencing

In order to phase nanopore reads and CpG methylation, we first called SNVs for both samples (NA19240 run 1 and Colo829BL) using Clair [22], then used SNVoter to normalize the quality scores and filter out false positives (Fig. 2e and Table 1). Finally, we used WhatsHap [23, 31] v0.18 with the default parameters and --ignore-read-groups on to determine haplotype status for each SNV.

Phasing of nanopore reads and CpG methylations

Phased SNVs and CpG methylation calls were leveraged to phase reads along their CpG methylation to diploid haplotypes. After filtering out a considerable number of false-positive SNVs using SNVoter, we still noticed 10–20% false-positive SNV calls in the datasets (Table 1). These unfiltered false-positive calls, in addition to sequencing errors, can result in reads incorrectly mapping to the SNVs from haplotype 1 when the read would actually belong to the haplotype 2 and vice versa. We noticed reads presenting SNVs from both haplotypes when mapping them to phased SNVs. In NA19240 run 0, out of

3M reads which mapped to at least one phased SNV,

2M reads had SNVs from both haplotypes (Additional file 2: Fig. S7a). To further overcome false positives and the sequencing error problem, we made several filtering steps to account for remnant false-positive SNVs and haplotype ratio (number of SNVs from HP1/HP2 or HP2/HP1). As we analyzed NA19240 run 0, we noticed a lower base quality distribution for false-positive SNVs compared to true positives that could not be filtered out by SNVoter (Additional file 2: Fig. S7b). Therefore, we assigned a minimum base quality threshold to successfully map each read at a phased SNV position. To manage reads containing SNVs from both haplotypes, we defined another threshold, the haplotype ratio, which ensures the reads are assigned to a single haplotype. Based on the quality distribution of SNVs (Additional file 2: Fig. S7b), the proportion of false positives which is between 10 and 20% (Table 1) and haplotype ratios (Additional file 2: Fig. S7a), and also based on empirical phasing at a few known imprinted regions, we used seven as the minimum base quality and 0.75 as haplotype ratio. We also used two as the minimum number of phased SNVs a read must present to be considered for phasing. In order to assign a read to a defined haplotype, a read must satisfy the following criteria:

As the reads are separated to different haplotypes, their associated CpG methylations from processed methylation call file are also separated to the corresponding haplotypes. We have integrated all the steps and filters in our python3 command-line tool, NanoMethPhase. Users can input methylation call data from Nanopolish, phased variant calling file, alignment file, and reference genome to NanoMethPhase (Fig. 3c). NanoMethPhase will output phased reads in aligned format, phased mock WGBS converted format for visualization (see the “Visualization” section Fig. 4c, d), phased methylation calls, and methylation frequency files. The latter can be used for differential methylation analysis to detect DMRs between haplotypes.

Differential methylation analysis

After phasing reads and CpG methylation to haplotypes, NanoMethPhase can perform DMA to detect mono-allelic methylated regions. It uses the DSS R package [36] for DMA. Users can perform all analyses in a command-line interface and directly perform DMA using the dma module of NanoMethPhase on the output phased methylation frequency data to detect DMRs.

Visualization

NanoMethPhase can convert phased reads into separate mock-WGBS bam files using the processed methylation call file from its methyl_call_processor module. Each cytosine in each CpG in each read is converted to a T, A, or N depending on the CpG being called as methylated, unmethylated, or uncalled. These pairs of files can be loaded into a genome browser such as IGV [34] in bisulfite mode for visualization (Fig. 4c, d).

Методы

Strains and growth conditions

Escherichia coli DH5α was used for plasmid amplification. T. reesei Rut-C30 (ATCC 56765), NG14 (ATCC 56767), and PC-3-7 (ATCC 66589) were purchased from ATCC (American type culture collection). T. reesei strain QM6a (ATCC 13631), QM9414 (ATCC 26921), and RL-P37 (NRRL 15709) were respectively purchased from DSMZ (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen), Institute of Microbiology-Chinese Academy of Sciences, and NRRL (Agriculture Research Service Culture Collection). E. coli was cultured in Luria broth (LB) medium. All the strains of T. reesei were cultivated at 28 °C (200 rpm) in 2× Mandels’ medium (1.0 g/L yeast extract, 3 g/L peptone, 0.6 g/L urea, 2.8 g/L (NH₄)₂SO₄, 4.0 g/L KH₂PO₄, 0.5 g/L CaCl₂, 0.6 g/L MgSO₄∙7H₂O, 5 mg/L FeSO₄∙7H₂O, 1.6 mg/L MnSO₄∙4H₂O, 1.4 mg/L ZnSO₄∙7H₂O, and 20 mg/L CoCl₂∙6H₂O) in which 2% glucose, 2% lactose, or 1% (w/v) Avicel was used as carbon source [31]. In addition, all these strains were maintained on potato dextrose agar (PDA) plates at 28 °C for the generation of conidia.

Plasmid construction, Agrobacterium-mediated transformation, and transformants screening

The primers used in this study are listed in Additional file 8: Table S2. LML2.1 [32] was used as a skeleton for the two plasmids, plasmid_A734 and plasmid_A723, to obtain two types of transformants bearing the ACE3-734 and ACE3-723 protein, respectively. The 5′- and 3′-arms of the homology double exchange for ACE3-734 and ACE3-723 sequences were constructed as described by Zhang et al. [26]. The DNA fragment of the 5′-arm of truncated ACE3-723 (approximately 900 bp) was cloned using the genome of Rut-C30 and the primer pair ace3-1/ace3-2₇₂₃. Similarly, the fragment of the 5′-arm of native ACE3-734 (approximately 1000 bp) was cloned using the QM6a genome and the primer pair ace3-1/ace3-2₇₃₄. The 3′-arms of these structures (about 1000 bp) were amplified from Rut-C30 or QM6a genomic DNA using the primer pair ace3-3/ace3-4. KOD-Plus-Neo (TOYOBO, Japan) was used for PCR. Next, the 5′- and 3′-arms of ACE3-723 and ACE3-734 were ligated in an orderly manner into PacI/XbaI and SwaI sites of linearized LML2.1 [32] to form Plasmid_A723 and Plasmid_A734, соответственно. The transformation experiments were performed using Agrobacterium-mediated transformation as described by Zhang et al. [32]. Correct intermediate transformants of A723 and A734, obtained by a homologous double exchange, were checked by diagnostic PCR [33] and quantitative PCR (qPCR Additional file 2) [34,35,36] to avoid unspecific locus integration (ectopic integration events). The primer pairs ace3-CF/D70-4 and HG3.6/ace3-CR were used in diagnostic PCR (Additional file 3: Figure S2A-B), which was followed by DNA sequencing (Additional file 3: Figure S2E) to confirm the correct knock-in at the ace3 locus in T. reesei genomes. The single-copy DNA fragment integration in transformed clones was verified by qPCR (Additional file 3: Figure S2C-D). The hygromycin marker gene in the transformants was excised using xylose-induced cre recombinase expression [32], and then the intermediate transformants were turned into the final transformants by excising the hygromycin marker gene. The final transformants were obtained and confirmed by hygromycin sensitive phenotype and with the second-round diagnostic PCR. Thus, the final A723/A734 transformants were used for further analysis.

Cellulase production in a shake flask and fermenter culture

Cellulase production in a shake flask was conducted according to a previously described method [26], with some modification. In brief, conidia (final concentration 10 6 /mL) of T. reesei strains were grown at 28 °C, in 20 mL of 2× Mandels’ medium containing 2% (w/v) lactose or 1% (w/v) Avicel (PH-101, Sigma-Aldrich) as the sole carbon source. The biomass dry weights were indirectly measured by calculating the total amount of intracellular proteins [37]. The supernatant was used for cellulase assays. Mycelia were collected for RNA extraction.

The activity of the produced cellulase was measured as described in another study [38]. In brief, the пNPCase and пNPGase activities were determined against 5 mM п-nitrophenol- d -cellobioside (пNPC, Sigma-Aldrich) and п-nitrophenyl β- d -glucopyranoside (пNPG, Sigma-Aldrich) as substrates in 50 mM sodium acetate buffer at pH 5.0 at 50 °C for 30 min, respectively. The release of п-nitrophenol was determined by measuring absorbance at 405 nm. One unit of пNPCase and пNPGase activities was defined as 1 μmol of п-nitrophenol released per minute. The CMCase activities were determined by incubation in 50 mM sodium acetate buffer with 1% carboxymethylcellulose (CMC, Sigma-Aldrich), at pH 5.0, 50 °C and for 30 min. The FPase activities were determined using Whatman filter paper as the substrate with a 50 mM sodium acetate buffer at pH 5.0, 50 °C, and for 30 min. One unit of CMCase or FPase activity was defined as the amount of enzyme producing 1 μmol of reducing sugar per min.

Cellulase production in a fermenter culture was conducted according to the method described by Li et al. [39] with some modification. In brief, fermentation was carried out in the 30-L fermenter (Shanghai Bailun Bio-technology Co., Ltd.) with an initial working volume of 10 L at 28 °C for mycelial growth. Seed cultivation was performed as follows: for each strain, about 10 9 conidia were inoculated into 1 L of 2× Mandels’ medium and 20 g/L of glucose, then cultivated by rotation (200 rpm) at 28 °C for 2 days. This culture was poured into 9 L of fresh 2× Mandels’ medium containing 10 g/L of wheat bran and 15 g/L of Avicel in a 30 L jar fermenter. A mixture of glucose and β-disaccharides (MGDS SUNSON ® , Beijing, China) was fed after inoculation. The feeding took place every 6 h, which maintained glucose concentration low, between 0.05 g/L and 0.30 g/L. The temperature was decreased to 25 °C after 48 h for more efficient cellulase production. The dissolved oxygen (DO) and pH were controlled as described by Li et al. [39]. The samples were taken every 24 h, and the supernatant was analyzed for the FPase, пNPCase, пNPGase, and CMCase activities. Mycelia were collected for biomass measurement.

RNA extraction and real-time reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR)

The methods used for RNA extraction and RT-qPCR methods are as those described by Chen et al. [33]. In brief, total RNA was extracted from cell fresh weight using a FastRNA Pro Red Kit (MPbio, Irvine, CA, USA). Synthesis of cDNA from total RNA was performed using the TransScript One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix (TransGen, Shanghai, China), according to the manufacturer’s instructions. For RT-qPCR, the PerfectStart™ Green qPCR SuperMix (TransGen, Shanghai, China) was used (see Additional file 8: Table S1). The transcriptional levels of the sar1 gene and the RNA of the parental strain were measured for reference calculation and data normalization. Primers used in RT-qPCR are listed in Additional file 8: Table S2.

Pre-treatment and enzymatic hydrolysis of lignocellulose biomass

Dry dilute acid pretreated and bio-detoxified corn stover (containing 37.6% cellulose and 4.4% hemicellulose) was donated by Professor Jie Bao [40]. The hydrolysis efficiency of the crude cellulase was evaluated by mixing 5% (w/v) dry pretreated and bio-detoxified corn stover as a substrate and the same amount of crude enzyme (5 mL) in 50 mM phosphate buffer to a final volume of 20 mL at 50 °C and pH 5.0 for 72 h. The glucose concentration in the supernatant was determined using a glucose assay kit and glucose yield was analyzed as described by Li et al. [39]. In brief, the glucose concentration in the supernatant was measured with the GOD (glucose oxidase) method. The glucose yield was calculated as follows: Glucose yield (%) = (Glucose (g) × 0.9 × 100)/(Cellulose in substrate (g)).

Statistical analysis

All experiments were performed with at least three independent samples with identical or similar results. The error bars indicate standard deviation (SD) of the mean of triplicates. Student’s т test was used to compare two samples, and Duncan’s multiple-range test was used for multiple comparisons. Within each set of experiments, п < 0.05 was considered significant.

Смотреть видео: История Packard